药用级微生物谷氨酰胺转胺酶的纯化工艺研究
日期:2015-03-03
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摘要为了提高谷氨酞胺转胺酶的纯度和扩展在医药领域的应用,探索了一种适合工业化生产的、安全高效的微生物谷氨酞胺转胺酶纯化方法。轮枝链霉菌发酵后,经离心10 000 r/min 4℃除去菌体,调节发酵液电导率至4. 1 mS/cm和pH6. 0后,以直线流速60cm/h通过SP Sepharose EE阳离子交换层析柱对目的蛋白高选择性和高载量地捕获,再通过phenyl sepharose 6 EE ( high sub )疏水层析柱进行精细纯化。纯化后经SDS-PAGE鉴定纯度达到95%以上,HPLC分析纯度>99 % o试剂测定内毒素含量为0. 013EU/ml,达到中国药典中血制品要求的低于0. 15EU/ml标准。 关键词谷氨酞胺转胺酶离子交换层析疏水层析纯化 中图分类号0555十.6
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