Ⅱ类限制性核酸内切酶
1 一般性状
分子质量为60 ku，单链多肽，最适pH为6～8；
NaCl有抑制作用，能被Mg2 激活，巯基有保护作用，
对热不稳定，通常是溶于含有50％甘油的缓冲液中贮存于–20℃环境下。取出使用时必须立即置于冰浴中。
2 识别序列
它对底物要求有特异的序列，通常的识别序列是4 bp ～6bp，有些则为7bp～8bp，甚或多于8bp。
多数限制酶的识别序列为回纹结构，在识别序列内或其附近水解DNA链中的磷酸二酯键。
3 酶切切口
有些酶在识别序列内的对称轴上切割，其切割产物具平头末端；
很多限制酶不能精确地在2个对称轴部位切割，而在识别序列2条链对应位上错位切割，切割产物有些形成5’-突出的粘性末端, 另一些为3’-突出的粘性末端。这些粘性末端的任何一侧都能和另一末端互补配对，使任何含有该识别序列的DNA分子都能和另一个含相同识别序列的DNA分子容易地连接成新的重组分子。
4．贮存与应用
限制酶对热不稳定，贮存于-20
