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一种筛选胞外纤维素酶产生菌的快捷、灵敏、有效的方法

日期:2015-11-11     浏览:713    下载:59     体积:2.44M     评论:0    
 一种筛选胞外纤维素酶产生菌的快捷、灵敏、有效的方法
陈晨1,3 宋华文2,3 王洁2,3 杨晓红1,3 崔丽娇2,3 江黎明2,3* 罗辉1,3*
(1. 广东医学院 化学教研室 广东 湛江 524023)
(2. 广东医学院 生物化学与分子生物学教研室 广东 湛江 524023)
(3. 环北部湾海岸特色微藻与微生物资源产品研发重点实验室 广东 湛江 524023)
摘 要:【目的】建立一种能快捷、灵敏、有效筛选高β-葡萄糖苷酶活性的胞外纤维素酶产生
菌的方法,用于胞外纤维素酶产生菌检测筛选。【方法】将以微晶纤维素(Avicel)或羧甲基纤维
素(CMC)为底物的胞外纤维素酶产生菌平板筛选法常用的刚果红或碘液浸泡染色改为碘液熏
染,减少碘液的消耗和对环境的污染;建立以对硝基苯酚-β-1,4-葡萄糖苷(pNPG)为底物的β-
葡萄糖苷酶发色底物平板筛选法;将两方法串联用于高β-葡萄糖苷酶活性的胞外纤维素酶产生
菌的筛选。【结果】建立了分别以CMC 和Avicel 为底物结合碘液熏染的胞外纤维素酶产生菌平
板筛选法和以pNPG 为底物的β-葡萄糖苷酶发色底物平板筛选法,从56 株真菌中筛选出了8
株纤维素酶活性水平为++++的胞外纤维素酶产生菌,从后者筛选出4 株高β-葡萄糖苷酶活性
的胞外纤维素酶产生菌。【结论】将以CMC 和Avicel 为底物结合碘液熏染的平板筛选法和以
pNPG 为底物的发色底物平板筛选法串联,可快捷、灵敏、有效地用于高β-葡萄糖苷酶活性的
胞外纤维素酶产生菌的筛选。
关键词:胞外纤维素酶,真菌,平板筛选,碘液熏染,β-葡萄糖苷酶,对硝基苯酚-β-1,4-葡
萄糖
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