杨玉兰‘,2,姜文侠‘,刘琦‘,孙瑞雪‘,2
1(天津市工业生物系统与过程工程重点实验室,中国科学院系统微生物工程重点实验室,
中国科学院天津工业生物技术研究所,天津,300308 2(天津科技大学,天津,300457
摘要采用甲硫氨酸对硝基苯胺底物检测甲硫氨酸氨肽酶酶活,通过优化甲硫氨酸氨肽酶检测条件提高检测
方法的准确性和灵敏性,并在此基础上建立了微型化的检测方法—酶标板法,适应微型化高通量发酵培养对
高通量酶活检测的要求,以实现氨肤酶产生菌真正意义上的高通量筛选。优化后的甲硫氨酸氨肤酶酶活微型化
检测条件为:氨一氯化钱缓冲液40 mmol/L,pH 8. 0、甲硫氨酸对硝基苯胺浓度6 mmol/L,温度60 0C ,酶反应时间
10 min,于380nm波长比色测定。