杨雯涵,郭晓晶,陈轶群,吕俊楠,谢飞,曹云鹤
(中国农业大学动物科技学院,动物营养学国家重点实验室,北京1oo19s}
摘要:通过构建硫色曲霉酸性木聚糖酶基因xy}}a串联双拷贝工程菌,提高酶的发酵活力。10 L发酵罐中,
双拷贝菌株发酵活力达3 574 U/mL。重组木聚糖酶的最适催化温度为500(;,最适反应pH为2.2 } 3.4,在
pH 1.7的酸性缓冲液下保持100 min,酶活残留70%以上。重组木聚糖酶对胃蛋白酶和胰蛋白酶也具有较好
的耐受性。该木聚糖酶在低pH条件下的高催化活性、耐酸性及蛋白酶耐受性,使之具有较好的应用前景。
通过体外模拟猪胃肠道环境以快速评价重组酶的作用效果。试验以小麦型日粮作为基础日粮,设计4个处理
组,重组酶的添加量分别为0 U/kg,2 000 U/kg,4 000 U/kg和6 000 U/kg,每个处理5个重复,使用SDS- II单
胃动物仿生消化系统模拟猪的胃肠道环境消化试验日粮,消化后的残渣烘干后测定其总能、粗蛋白质、中性
洗涤纤维含量以计算其消化率。结果表明,添加重组酸性木聚糖酶显著提高了总能、粗蛋白质(线性和二次;
P< 0.01)和中性洗涤纤维的消化率(线性和二次;P<0.05)。重组酶的最适宜添加量为4 000 U/kgo
关键词:酸性木聚糖酶;双拷贝菌株;毕赤酵母;体外法