一 准备工作
精确称取1 g 酶粉，用蒸馏水定容到200ml，配制5g/L的稀释酶液。
准备好新华1号滤纸条，规格：1cm Χ 6cm。
配备pH = 4.8的醋酸缓冲溶液。
按照下表配备3，5-二硝基水杨酸试剂（DNS试剂）：
二 标准葡萄糖曲线绘制（吸光度值与葡萄糖含量线性回归）
按下表1-1各取1 mg/ml标准葡萄糖液、3，5-二硝基水杨酸试剂（DNS试剂）：
表1-1
在沸水浴中反应15 min，冷却后定容到25 ml，在λmax = 550nm下，用分光光度计测量吸光度值，以吸光度值为纵坐标，葡萄糖量为横坐标，绘制标准曲线。或用Excel进行相应的线性回归。
三 滤纸酶活力测定
将新华1号滤纸一条放入有标准刻度的试管中。
精确加入1.8 ml pH = 4.8醋酸缓冲溶液。
精确加入5g/L的稀释酶液0.2 ml，摇匀。
在50±1℃水浴中保温反应60min。
保温反应结束，精确加入3ml DNS试剂。
放入沸水浴中反应15min（注意：将8空白对照液同浴反应）。
冷却后加入蒸馏水定容到25ml。
空白对照液的配制：
(1)精确加入0.2ml稀释酶液。
(2)精确加入1.8 ml pH = 4.8醋酸缓冲溶液。
(3)放入新华1号滤纸一条。
(4)精确加入3ml DNS试剂。
(5)随同对照样，放入沸水浴中反应15min(注意：参见操作步骤6)。
(6)冷却后加入蒸馏水定容到25ml。
9．以空白对照液调零点，在λmax = 550nm下，用分光光度计测量吸光度值。
滤纸酶活力 = A × 5 × 200 × 1000 / 60 （u/g）
A 吸光度值在标准曲线上对应的葡萄糖量（mg）。
